血培养你真的会采集吗？这些知识点你是否都了解？

抗生素时代，感染仍是人类健康的主要“杀手”。据统计，感染性疾病占世界人口死因的25%。临床病原微生物检测是抗菌药物合理应用和细菌耐药性监测的重要保障，其中血培养是诊断血流感染最直接和最可靠的方法。

血培养是将新鲜离体的血液标本接种于营养培养基上，在一定温度、湿度等条件下，使对营养要求较高的细菌生长繁殖并对其进行鉴别，从而确定病原菌的一种人工培养法。

规范的血培养是血流感染诊断的金标准，阳性结果不仅可以证实感染性病原体的存在和种类，还可以通过随后进行的药敏试验结果指导临床优化抗生素的选择，改善患者预后。

想要获取准确的血培养结果，需要临床医生、护理人员和检验科工作人员共同做好质量控制。那么，我们该如何为血培养的正确采集把好关呢？

一、明确采集血培养的指征

1、体温>38℃或

2、寒战；

3、外周血白细胞计数增多（计数>10.0×109/L，特别有“核左移”时）或减少（计数9/L）；

4、呼吸频率>20次/min或动脉血二氧化碳分压（PaCO2）

5、心率>90次/min；

6、皮肤黏膜出血；

7、昏迷；

8、多器官功能障碍；

9、血压降低；

10、炎症反应参数如C反应蛋白、降钙素原（PCT）、1，3-β-D-葡聚糖（G试验）升高等。

二、合适的采集时间

最佳采集时间

寒战或发热初起时采集（2小时内采集效果最佳）；应用抗菌药物之前采集最佳（采集前已用药的应注明，并最好在停药6~8小时后或下次用药前采集）

正确的采集套数

需氧瓶-厌氧瓶

“一套血培养”指从同一穿刺点采集的血液标本，通常分别注入需氧和厌氧瓶。

成人每次应采集2~3套（以提高病原菌检出率和判断有无污染菌），每套从不同穿刺点进行采集并标记部位。另外，由于抗生素开始治疗后，血液中的细菌并不能立即被清除，因此5天内无需重复采集。

如怀疑感染性心内膜炎、急性心内膜炎应立即采集血培养。宜在经验用药前30min内不同部位采集2~3套血培养。亚急性心内膜炎宜每隔0.5h~1h采集一套血培养，不同部位共采集3套血培养。如24h培养阴性，宜加做2套血培养。研究表明血流感染患者中，1套的阳性检出率为73.2%，2套为93.3%，3套为96.9%。

儿童通常仅采集需氧瓶。有以下高危因素时应考虑厌氧瓶培养：其母产褥期患腹膜炎，或慢性口腔炎或鼻窦炎、蜂窝组织炎、有腹腔感染的症状和体征、咬伤、接受类固醇治疗的粒细胞缺乏患儿。

考虑肺炎链球菌菌血症时，宜同时做脑脊液培养。

三、足够的采集量和培养时间

标本采集量

采血的总量是影响病原体检出的重要因素之一。每瓶应采血8~10ml，儿童患者因为血液中病原菌浓度较高，血培养量无需等同于成人，但也推荐采血量每瓶不少于2ml。

培养时间

血培养推荐35℃~37℃孵育7天，一些缓慢生长的苛养菌（如巴尔通体、李斯特菌属、布鲁菌属和奴卡菌属等）和双向真菌需要更长的孵育时间。

酵母菌在需氧瓶中易生长，多数酵母菌孵育2~5天可检出，怀疑双相真菌或丝状真菌感染，孵育时间需延长2~4周。由于分枝杆菌繁殖缓慢，针对其的培养瓶应至少孵育6周。

血培养随时间变化的检出率

四、正确的采集方法

采集静脉血（仅在评估导管相关性血流感染时采集导管血）。血培养宜单独采血，与其他检测项目同时采血，应先采血培养瓶，以避免污染。

采集前做好手卫生，静脉穿刺点选定后，去除血培养瓶的塑料瓶帽，切勿打开金属封口环和胶塞，使用75%乙醇或70%异丙醇消毒，自然干燥60s。注意采血前检查血培养瓶是否完好无损、是否过期。

在穿刺前或穿刺期间，为防止静脉滑动，应戴无菌乳胶手套固定静脉。

穿刺点皮肤消毒

1、三步法

第一步：75%酒精擦拭静脉穿刺部位，待干30s以上；

第二步：1%~2%碘酊作用30s或1%碘伏作用60s，从穿刺点向外划圈消毒，消毒区域直径达3cm以上；

第三步：75%乙醇擦拭碘酊或碘伏消毒过的区域进行脱碘。

对碘过敏的患者，在第一步基础上再用75%乙醇消毒60s，待酒精挥发干燥后采血。

2、一步法

0.5%葡萄糖酸洗必泰作用30s（不适用于2个月以内的新生儿），或70%异丙醇消毒后自然干燥（适用于2个月以内的新生儿）。注意穿刺点消毒后不可再触碰。

五、血培养采集流程

手卫生（可手消） 戴口罩 75%酒精消毒培养瓶的橡皮塞，待干60s 75%酒精消毒穿刺部位，由内向外划圈，作用（待干）30s 以碘酊或碘伏消毒穿刺部位（碘酊作用30s，碘伏作用1.5-2min），从穿刺点由内向外划圈，消毒范围直径3cm以上 75%酒精脱碘作用60s，待干 持穿刺针按常规方法刺入静脉，另一头刺入相应血培养瓶内。

成人采血量8-10ml/瓶，婴幼儿1-5ml/瓶（严格无菌操作，不允许在皮肤消毒后用手接触静脉）。

血液注入血培养瓶后轻摇瓶身，做好标记 立即送检（切忌将培养瓶冷藏或冷冻）。

注意事项

用注射器无菌穿刺取血后，勿换针头（如行第二次穿刺，换针头），直接注入血培养瓶，不应将抗凝血注入血培养瓶。血液接种到培养瓶后，轻轻颠倒混匀以防血液凝固。

血培养瓶应在2h之内送至实验室孵育或上机；如不能及时送检，应将血培养瓶置于室温下，切勿冷藏或冷冻。用采用密封袋和硬质防漏的容器运送标本。若运送到参考实验室，应使用符合生物安全规定的包装。

【参考文献】

[1]临床微生物标本规范化采集和送检中国专家共识.2017

[2]WS/T 503-2017临床微生物实验室血培养操作规范

[3]Weinstein et al. Detection of Bloodstream Infections in Adults: How Many BloodCultures Are Needed. J ClinMicrobiol. 2007; 45:3546-3548.

[4]F.R.Cookerill III et al. Clinical Infectious Diseases 2004; 38:1724-30.

[5]Mermel LA et al. Ann Intern Med. 1993; 119:270-272.

来源：航医检验科

编辑：yeah 审校：小冉